Tewitro® TW 24
Transepidermale Wasserverlust Messung auf Hautgewebemodellen
Das Tewitro® TW 24 ist das einzige Gerät, das die Wasserabdampfrate auf bis zu 24 Hautgewebekulturen (Mikrotiterplatten mit Kulturmedium) simultan mit der weltweit meistgenutzten "offenen Kammer-Messung" des Tewameter® bestimmen kann.
Anwendungsgebiete
Für jedes Produkt, das auf die Haut aufgebracht wird, sind Wirksamkeits- und Produktsicherheitstests unabdingbar. Hautgewebemodelle werden in diesem Bereich als schnelle und einfache Methode eingesetzt, um Tierversuche oder Versuche an menschlichen Probanden zu vermeiden.
- Sie sind der einzige Weg, dermale Absorption, die Grundlage der Produktsicherheitstests zu studieren
- In vitro Tests und Vermeidung von Tierversuchen werden in vielen internationalen Richtlinien vorgeschrieben: z.B.. ECVAM (European Centre for the Validation of Alternatives to Animal Testing), OECD (Organisation for Economic Co-operation and Development) oder REACH (Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals)
Schäden an der Barrierefunktion der Haut zeigen sich unmittelbar in einer erhöhten Wasserabdampfrate (TEWL). Auch für Claims wie "Barriereverbesserung" oder „-erhaltung" werden Zellkulturen zusammen mit TEWL-Messung herangezogen. Sobald die Barriere der Haut geschädigt ist, tritt eine messbar erhöhte TEWL-Rate auf. Produkte, die die Haut verbessern, zeichnen sich durch niedrigere, stabile TEWL-Messwerte aus.
Das Tewitro® Messprinzip
Vollständig bestückt, kann das Tewitro® TW 24 in 24er Mikrotiterplatten (6 x 4 Inserts) eingesetzt werden. Die Sonde ist mit bis zu 6 Reihen mit je 4 Messstellen ausgestattet.
Jede Messstelle ist mit zwei Sensorenpaaren ausgestattet, die kontinuierlich Temperatur und relative Feuchte erfassen, und so die Wasserabdampfrate der Zellkulturen auf dem Boden des Inserts bestimmen. Die Verhältnismessung zwischen oberem und unterem Sensorpaar wird als Transepidermaler Wasserverlust (bekannt durch in-vivo Messungen direkt auf der Haut) in g/h/m² ausgedrückt. Diese "offene Kammer"-Messung des TEWL (Tewameter®-Methode) ist die weltweit meistgenutzte Methode zur Erfassung der Qualität der Hautbarrierefunktion. Hunderte von Studien belegen diese Tatsache. Die TEWL-Messung mit dem Tewameter® wurde sogar schon auf der Internationalen Raumstation ISS eingesetzt, um die Haut der Astronauten bei Langzeitaufenthalt im All zu überwachen.
Die Software
- Die anwenderfreundliche Software zeigt übersichtlich alle 24 TEWL-Werte (einen pro Messstelle), zusammen mit zwei frei einstellbaren Mittelwerten und ihrer zugehörigen Standardabweichung. Sie bietet auch die Möglichkeit, sich während der gesamten Messung die Temperatur- und relativen Feuchtewerte von oberem und unterem Sensorpaar (2 x 24) mitanzeigen und -abspeichern zu lassen.
- Kurvenansicht für jede Messstelle durch einen einzigen Klick.
- Messungen von wenigen Sekunden bis hin zu 24-Stunden-Langzeitmessungen möglich.
- Einstellung automatischer Messbeendigung möglich (z.B. bei Erreichen einer bestimmten Stabilität oder Zeit)
- Warnung, wenn RH höher als normaler Bereich für Messunsicherheit
- Einfache & schnelle Kalibrierüberprüfung und Offset- Funktion
- Wenn die Raumsensor RHT Sonde angeschlossen ist, werden ihre Werte konstant während der Messung angezeigt und mit den Messwerten abgespeichert.
Einsatz an in vitro Modellen
Das Tewitro® TW 24 wurde für den Einsatz auf Hautgewebemodellen entwickelt. Bis jetzt haben wir Erfahrungswerte mit den folgenden im Markt erhältlichen Systemen:
- Lab cyte (www.labcyte.com), EPI-MODEL® 24, ein Produkt der Corning "Falcon" Reihe und
- Episkin® Produkte Skin Ethic® RHE und RHPE 8 mm, 0,5 cm2 (http://www.episkin.com/en/SkinEthic-RHE) - mit zusätzlichen Adaptern
- Mattek Epiderm® 24 Zellkulturen System (www.mattek.com) - mit zusätzlichen Adaptern
- Thermo Fisher Scientific Nunc® Cat. Nr. 141002 (www.thermofisher.com) mit zusätzlichen Adaptern für Wells und Höhe
- Merck Millicell Millipore PIHP01250 mit zusätzlichen Adaptern
Das Tewitro® TWR eignet sich mit etwas höheren Füßen und Edelstahl Diffusionsröhren auch, um auf dreidimensionalen Hautmodellen z.B. dem Phenion® FT (https://www.phenion.com) von Henkel direkt in der Wellplatte zu messen.
Für andere Hautgewebemodelle fragen Sie uns bitte oder schicken Sie uns eine Muster-Wellplatte. Die Sonde kann spezifisch an viele verschiedene Systeme angepasst werden (fragen Sie nach einem Angebot).
Für die TEWL-Messung auf Gewebemodellen ist es wichtig, dass die Well-Platte mit dem Umgebungsmedium auf Hauttemperatur angewärmt wird. Unter Labortemperatur (20-22°C), sind TEWL-Unterschiede weniger sichtbar. Sobald auf Hauttemperatur angewärmt, werden Unterschiede zwischen einzelnen Produkten sofort sichtbar. Wir empfehlen den Einsatz einer auf 33 °C regelbaren Heizplatte.
Typische Anwendungsbeispiele
Sehen Sie hier ein Video zu einer typischen Anwendung (Produktwirksamkeit).
Auf voraktivierten Gewebekulturen, bevor das zu testende Produkt aufgebracht wird:
Kontinuierliche Messung der Abdampfrate, die typischerweise sehr hoch ist, wenn die Mikrotiterplatten aus dem Inkubator kommen, bis ein (für Zellkulturen) normaler, stabiler TEWL-Wert erreicht ist, der anzeigt, das nun das Produkt aufgebracht werden kann. Der dann gemessene TEWL Wert dient gleichzeitig als Kontrollwert vor der Behandlung (T0). Die Messung zeigt außerdem an, ob alle Gewebemodelle in Ordnung sind.
Vorteile:
- Die Sonde kann kontinuierlich über längere Zeiträume messen (nur mit "offenem Kammer"-System möglich).
- Die Messung zeigt an, ob alle Gewebekulturen in Ordnung sind (Qualitätscheck).
- Die Software zeigt an, wann die Messung stabil ist (Standabweichung hat einen bestimmten Schwellenwert unterschritten).
- Es kann so sichergestellt werden, dass Produkte bei wiederholten Tests immer unter genau den gleichen Bedingungen appliziert werden.
- Ein Kontrollmesswert vor Applikation wird für alle Inserts aufgezeichnet. So können spätere Unterschiede im TEWL direkt dem Produkt zugeordnet werden.
Messung des tatsächlichen Effektes der Produkte auf die Barrierefunktion (Produktwirksamkeit und - sicherheit):
Wenn die Mikrotiterplatte das nächste Mal aus dem Inkubator kommt, dient die TEWL-Wert-Entwicklung wiederum der Überwachung, wann das zusätzliche Wasser verdampft ist, und die Messung des eigentlichen Effekts beginnen kann. Je nach aufgebrachtem Produkt ist die Barriere mehr oder weniger intakt/geschädigt. Zellpartikel können mikrobiologisch im Umgebungsmedium nachgewiesen werden. Der Umfang der Schädigung kann jedoch mittels TEWL-Wert-Messung akkurat ausgedrückt werden. Je höher die TEWL-Werte bleiben, desto mehr Schädigung der Barriere hat stattgefunden.
Zusätzliche Vorteile:
- Das Mikroklima in den Insert unterliegt einer ständigen Veränderung, sobald sie den Inkubator verlassen haben. Außerdem trocknen die Zellkulturen aus und schrumpfen zusammen. Um aussagekräftige, zuverlässige Ergebnisse zu erzielen, ist es deshalb notwendig, alle Inserts zur gleichen Zeit und den gleichen Bedingungen zu messen und den perfekten Zeitpunkt für die Produkteffektmessung nicht zu versäumen. Einzelne Messungen in den Inserts nacheinander würden viel zu lange dauern, um reproduzierbare Ergebnisse zu erzielen.
- Die Messung mit dem Tewitro® TW 24 ist extrem zeit- und arbeitskraftsparend.
- Die "offene Kammer"-TEWL-Messung behindert die normale Abdampfung nicht und erzeugt keine Okklusion.
Technische Daten
Die Tewitro® TW 24/TW 24R Sonde wird mit eigener Software und einer MPA 2 Einheit geliefert (Details zum MPA 2 finden sie unter Basisgeräten).
Sonde TW 24:Maße: 113 (B) x 170 (L) x 33 (H - mit Standardfüßen) mm, Gewicht: 300 g, Kabellänge: ca. 1,20 m, Rahmenmaterial: eloxiertes Aluminum (AlMg 3), Stromverbrauch: max. 12 V Austattung: 24 Sensorpaare (48 Einzelsensoren)
Messbereich: Temperatur: 0 - 50° C, Auflösung: typ. 0.015 °C, RH: 0% - 100% RH, Auflösung: typ. 0.01 % RH, TEWL: 0 bis 320 g/h/m²
Messunsicherheit:
(RH ≤ 92%): ± (5 % des angezeigten TEWL Werts + 1,0 g/m²/h)
(RH > 92%): ± (10 % des angezeigten TEWL Werts + 2,5 g/m²/h)
Arbeitsbedingungen: T: 10-40° C RH: 30-70 % RH
Sonde TW 24R
Siehe TW 24
Maße: 113 (W) x 170 (L) x 42 (H) mm
rostfreie Stahl Röhrchen: 27 mm, 11 mm Ø
Technische Änderungen vorbehalten.
Andere erhältliche Sonden zur TEWL Messung
- Invitro-Tewameter® VT 310: Sonde zur optimalen Befestigung auf einer Franzzelle
- Tewameter® TM Hex: ultimative TEWL Messung mit einer Kammer
- Tewameter® TM Nano: TEWL Messung auf kleinen oder schwer zugänglichen Hautstellen (z.B. Nägel, Lippen, behaarte Kopfhaut)
- Tewameter® Triple TM 330T: Sonde mit drei flexibel angeordneten Messköpfen, die simultan entweder eine große Hautstelle oder drei verschiedene Hautstellen messen können